Testy na lymskou boreliózu - jak vypadají a jaké jsou náklady na testy na boreliózu

Testy na lymskou boreliózu by měly být prováděny pokaždé, když došlo k kousnutí klíštěte. Na zahájení diagnostiky musíte počkat až několik týdnů. Před tím je možné otestovat klíště, které nás kouslo, zda je nositelem nějaké nemoci. Jaké je testování na lymskou boreliózu a jaká je cena testů?

Testování na lymskou boreliózu (bakteriální onemocnění přenášené klíšťaty způsobené Borrelia burgdorferi a jeho odrůdami) se doporučuje provést co nejdříve po kousnutí klíšťaty.

Při diagnostice lymské boreliózy se používají specifická diagnostická schémata, která jsou založena především na sérologických metodách.

S přihlédnutím ke složitému patomechanismu onemocnění a omezením laboratorních metod však může lymská borelióza způsobit mnoho diagnostických obtíží.

Proto je na trhu stále více laboratorních testů, které by tento problém mohly vyřešit. Bohužel většina z nich nemá prokázanou diagnostickou hodnotu a neměla by být používána při rutinní diagnostice lymské boreliózy.

Obsah:

1. Včasná lokální borelióza - laboratorní testy
2. Včasná diseminovaná lymská borelióza - test na boreliózu
3. Pozdní borelióza - jaké testy detekují boreliózu?
4. Lymská borelióza - monitorování léčby
5. Lyme nemoc - cirkulující imunitní komplexy
6. Lyme nemoc - test transformace lymfocytů (LTT)
7. Lyme nemoc - test CD57
8. Berlioz - test ELFA a CLIA
9. Lyme nemoc - vyšetření klíšťat odstraněných z kůže

Včasná lokální borelióza - laboratorní testy

V této fázi, po kontaktu s infikovaným klíštěm, dochází k lokální infekci a tzv migrující erytém (latinsky erythema migrans), což je symptom charakteristický pro lymskou boreliózu.

Přítomnost erytému v místě kousnutí klíštěte je dostatečná k prokázání infekce Borrelia. Časné místní stádium lymské boreliózy trvá několik dní až přibližně 4 týdny a u pacienta se mohou objevit příznaky podobné chřipce.

Je to nejranější stádium infekce, kdy sérologické metody (ELISA a Western blot), testování na přítomnost protilátek IgM a IgG, mohou poskytnout falešně negativní výsledky. V této fázi tzv sérologické okno, což je počáteční období infekce, kdy tělo ještě nevytváří protilátky proti borreliím.

První protilátky IgM se objevují kolem 2. týdne onemocnění, ale u většiny lidí je jejich přítomnost detekována až za několik týdnů. V případě negativního sérologického výsledku by měl být test opakován přibližně 3-4 týdny po infekci.

ELISA a Western blot jsou hrazeny z Národního fondu zdraví, ale doporučující lékař musí mít důvody pro jejich objednání. Soukromě stojí test ELISA od 30 do 100 PLN a Western blot od 80 do 200 PLN.

Molekulární testování pomocí PCR lze zvážit ve velmi rané fázi infekce. Metoda detekuje bakteriální genetický materiál (DNA), který je v počátečním stadiu infekce nejhojnější v tělních tekutinách. Čím delší je doba od infekce, tím menší je pravděpodobnost detekce bakteriální DNA.

Je však třeba mít na paměti, že v Polsku stále neexistuje standardizace molekulárních metod v diagnostice lymské boreliózy, a proto se tato metoda nedoporučuje jako diagnostický nástroj. Molekulární testování není hrazeno z Národního fondu zdraví a náklady mezi 160-200 PLN.

Stojí za to vědět

Fáze infekce Borrelia burgdorferi:

• časná místní Lyme nemoc
• časně šířená Lyme nemoc
• pozdní borelióza

Přečtěte si také: Erytém putování po kousnutí klíštěte. Jak to poznat Vakcína proti klíšťové encefalitidě

Včasná diseminovaná lymská borelióza - test na boreliózu

Ve stadiu rané diseminované boreliózy je infikováno mnoho orgánů, kloubů, svalů, nervového systému a kardiovaskulárního systému. Časná borelióza se vyvíjí s bolestmi hlavy, zánětem lícního nervu, únavou nebo ztuhlostí krku. Tato fáze trvá přibližně několik týdnů po infekci.

Ve stadiu rané diseminované boreliózy jsou přítomny hlavně protilátky IgM. Za 6-8 týdnů po infekci se také začínají objevovat protilátky IgG. Proto jsou sérologické metody základem diagnostiky v této fázi infekce.

Sérologická diagnóza lymské boreliózy začíná fází screeningu, tj. Provedením citlivého testu ELISA.

Pokud je výsledek negativní, znamená to, že nebyly detekovány žádné spirochety Borrelia nebo je výsledek falešně negativní. Pokud je výsledek pozitivní nebo slabě pozitivní, mělo by se provést potvrzující Western blot testování, které je vysoce specifické, aby se potvrdily výsledky metody ELISA.

Pokud existuje podezření na neuroboreliózu, lze provést testování molekulární PCR z mozkomíšního moku. Metoda PCR je velmi citlivá a vzhledem k tomu, že počet spirochet Borrelia v mozkomíšním moku je malý, může být užitečná při stanovení diagnózy.

Bez předchozího sérologického testování však nepředstavuje diagnózu infekce.

Pozdní lymská borelióza - jaké testy detekují boreliózu?

Poslední fází infekce je pozdní lymská borelióza, při níž dochází k dalšímu šíření bakterií do orgánů a vzniku stále závažnějších komplikací infekce. Objeví se pozdní borelióza, kloubní borelióza nebo atrofická dermatitida. Pozdní lymská borelióza může trvat až několik let.

V této fázi infekce jsou sérologickými metodami detekovány pouze protilátky IgG. Vysoké hladiny IgG proti spirochetám Borrelia a přítomnost příznaků naznačují lymskou boreliózu. V některých případech (zejména u lidí, kteří dostávali antibiotickou léčbu velmi rychle v raných fázích infekce) však mohou protilátky IgM přetrvávat několik let. V takových situacích tyto protilátky nesvědčí o aktivní infekci.

Co je to borelióza?

Lymská borelióza - monitorování léčby

Jednou z největších obtíží v diagnostice lymské boreliózy je nedostatek citlivých a specifických laboratorních markerů, které by mohly posoudit účinnost antibiotické léčby. Ve výchozím nastavení se k hodnocení jeho účinnosti používá sledování symptomů onemocnění.

Výzkum naznačuje, že stanovení hladin IgM a IgG protilátek proti spirochetovému antigenu VLsE / C6 lze použít ke sledování účinnosti infekce Borrelia.

Spirální protein VlsE / C6 způsobuje velmi silnou a rychlou reakci imunitního systému. Přidání tohoto antigenu k sadě sérologických testů významně zvyšuje citlivost testu. Přítomnost IgG protilátek proti proteinu VLsE / C6 u pacientů s lymskou boreliózou je:

• 20–50% u pacientů v rané fázi infekce
  
  
• 70–90% u pacientů s časně diseminovanou lymskou boreliózou
  
  
• téměř 100% u pacientů s pozdní Lyme chorobou

Vyšetření není hrazeno z Národního fondu zdraví a náklady mezi 80-150 PLN.

Lyme nemoc - cirkulující imunitní komplexy

Sérologické testy jsou základem pro diagnostiku lymské boreliózy. Existují však klinické situace, které mohou způsobit, že tyto testy budou falešně negativní. Jedním z nich je přítomnost tzv imunokomplexy, které se skládají z antigenů Borrelia a specifických protilátek IgM nebo IgG.

Imunitní komplexy blokují protilátky, což znemožňuje jejich detekci sérologickými metodami, a proto mohou způsobit falešně negativní výsledky. K tomuto problému dochází hlavně u velmi intenzivních infekcí.

Pokud má pacient zjevné příznaky lymské boreliózy a výsledky testu jsou negativní, nabízejí některé laboratoře test, který zahrnuje chemické rozložení imunitních komplexů. Tato léčba je zaměřena na uvolňování protilátek a teprve poté na měření jejich koncentrace.

Výzkum naznačuje, že použití takového postupu před sérologickým vyšetřením může významně zvýšit detekci protilátek proti antigenům Borrelia. Tato metoda se však rutinně nepoužívá kvůli nedostatečné standardizaci v laboratořích.

Cena testu se pohybuje mezi 110-210 PLN (za protilátku IgM nebo IgG) a není hrazena z Národního fondu zdraví.

Lyme nemoc - test transformace lymfocytů (LTT)

Test transformace lymfocytů (LTT) se používá v různých oblastech medicíny, včetně v transplantologii, alergologii a nepřímo v diagnostice spirochet Borrelia. Při diagnostice lymské boreliózy test identifikuje přítomnost imunitních buněk (T lymfocytů) v krvi pacienta, které byly v kontaktu s bakteriemi. Test používá techniku ​​ELISPOT, jejíž princip je podobný metodě ELISA, ale je citlivější než ona.

Někteří navrhují, aby se testování LTT na spirochety Borrelia provádělo za účelem:

• potvrzení aktivní infekce u lidí s pozitivními výsledky sérologických testů, ale bez příznaků jasně naznačujících onemocnění
  
  
• potvrzení aktivní infekce u jedinců s negativními nebo hraničními sérologickými testy, ale s klinickými příznaky onemocnění
  
  
• sledování infekce po léčbě antibiotiky
  
  
• hodnocení recidivy lymské boreliózy

Podle doporučení pracovní skupiny zveřejněných v roce 2014 se při diagnostice lymské boreliózy nedoporučuje jak test LTT, tak stanovení hladiny protilátek v cirkulujících imunitních komplexech.

Tyto metody ještě musí projít validací (tj. Potvrzením jejich spolehlivosti), aby mohly být užitečným diagnostickým nástrojem.

Cena testu se pohybuje mezi 400–550 PLN a není hrazena z Národního fondu zdraví.

Lyme nemoc - test CD57

Povrchový marker CD57 je protein, který se vyskytuje na povrchu imunitních buněk - NK buněk (Natural Killers).

Lékaři ze skupiny ILADS, tj. Mezinárodní společnost pro lymskou boreliózu a související nemoci, věří, že v chronické fázi lymské boreliózy je imunitní systém potlačen, což se odráží ve snížení populace NK buněk pomocí markeru CD57.

Předpokládají, že měření jejich počtu v krvi může být použito k posouzení aktivity onemocnění. Avšak stejně jako u metody LTT a narušení imunitních komplexů vyžaduje tato metoda stále validaci. Cena testu se pohybuje kolem 170 PLN a není hrazena z Národního fondu zdraví.

Více informací o testu CD57 najdete zde.

Berlioz - test ELFA a CLIA

V diagnostice lymské boreliózy se primárně používá metoda ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Mnoho laboratoří však používá i jiné sérologické metody, jako je ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay) prováděné s Vidas® a CLIA (Chemiluminescent Immunoassay) prováděné s analyzátorem Liaison®.

Jak jsou odlišní? Princip fungování těchto tří metod je velmi podobný a využívá specifické protilátky a jejich schopnost vázat se na antigeny. Metody ELFA a CLIA umožňují automatizaci analýz a rychlejší provádění testů v laboratoři. Tyto metody jsou také schopné detekovat nižší koncentrace protilátek v testovaném biologickém materiálu.

Pokud jde o spolehlivost výsledků získaných třemi metodami, jsou téměř stejné. Pozitivní nebo slabé pozitivní výsledky získané metodami ELFA a CLIA, stejně jako u metody ELISA, by měly být potvrzeny analýzou Western blot.

Stojí za to vědět

Lyme nemoc - vyšetření klíšťat odstraněných z kůže

Některé laboratoře nabízejí testování klíšťat odstraněných z kůže na přítomnost DNA Borrelia. Podle doporučení pracovní skupiny zveřejněných v roce 2014 taková studie absolutně není diagnostickou metodou lymské boreliózy.

Přestože riziko přenosu bakterií z klíšťat na člověka je úměrné době sání krve, přítomnost spirochetové DNA v klíšťatu není synonymem infekce a její nepřítomnost infekci nevylučuje.

Navrhovatelé metody se domnívají, že je užitečná při rozhodování o zavedení antibiotické terapie u lidí s příznaky svědčícími pro lymskou boreliózu, ale bez přítomnosti erythema migrans. Cena těchto respondentů se pohybuje mezi 100–500 PLN a není hrazena z Národního fondu zdraví.

Literatura

1. Laboratorní diagnostika chorob přenášených klíšťaty. Doporučení pracovní skupiny: Národní komora laboratorních diagnostiků, Národní ústav veřejného zdraví - Národní ústav hygieny, Národní konzultant v oblasti infekčních nemocí, Ústav infekčních nemocí a neuroinfekcí, Lékařská univerzita v Białystoku, Polská virologická společnost, Varšava 2014.
2. Rychlik U. et al. Laboratorní diagnostika testu transformace lymfocytů (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
3. Marques A. R. Laboratorní diagnostika lymské boreliózy - pokroky a výzvy. Infect Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295–307.
4. Marques A. a kol. Počty přirozených zabijáckých buněk se neliší u pacientů se syndromem po lymské borelióze a u kontrol. Clin Vaccine Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Význam antigenu Vlse / C6 jako markeru v diagnostice rané lymské boreliózy a studiu jeho účinnosti léčby. Zdravotní problémy civilizace 2017; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. a kol. Návrh nového metodického přístupu a interpretace výsledků protilátek proti Borrelia burgdorferi - analýza protilátkového složení cirkulujících imunitních komplexů. Revmatologie 2011; 49, 5: 328–334.
7. Muraczyńska B. a Gałęziowska E. Kontroverze týkající se diagnostiky a léčby boreliózy ve světě. General Medicine and Health Sciences, 2015; 21 (4): 372–377.

O autorovi

Karolina Karabin, MD, PhD, molekulární biolog, laboratorní diagnostik, Cambridge Diagnostics Polska Biolog se specializací na mikrobiologii a laboratorní diagnostik s více než 10 lety zkušeností v laboratorní práci. Absolvent Fakulty molekulární medicíny a člen Polské společnosti pro lidskou genetiku, vedoucí výzkumných grantů v Laboratoři molekulární diagnostiky na Ústavu hematologie, onkologie a interních chorob Lékařské univerzity ve Varšavě. Na 1. lékařské fakultě Varšavské lékařské univerzity obhájila titul doktora lékařských věd v oboru lékařské biologie. Autor mnoha vědeckých a populárně-vědeckých prací v oblasti laboratorní diagnostiky, molekulární biologie a výživy. Denně jako specialista v oblasti laboratorní diagnostiky vede věcné oddělení v Cambridge Diagnostics Polska a spolupracuje s týmem dietologů na CD Dietary Clinic. Své praktické poznatky z diagnostiky a dietoterapie nemocí sdílí s odborníky na konferencích, školeních a v časopisech a na webových stránkách. Zvláště se zajímá o vliv moderního životního stylu na molekulární procesy v těle.